Sobre la base de un historial de desarrollo de vectores virales adenoasociados AAV como una herramienta clínica innovadora para la terapia génica y la edición de genes, los investigadores del Children's Hospital of Philadelphia CHOP informan un método más sensible para capturar la huella de los vectores AAV -- una amplia gama de sitios donde los vectores transfieren material genético.
Al capturar la gama completa de patrones de expresión génica causados por los vectores AAV, se espera que la técnica avance significativamente en el campo de la terapia génica que ya se está desarrollando rápidamente. Los resultados innovadores aparecieron hoy en la revista Comunicaciones de la naturaleza .
Los vectores AAV son herramientas de bioingeniería que usan un virus inofensivo para transportar material genético modificado de manera segura a los tejidos y las células impactadas por condiciones difíciles de tratar. Estos vectores entregan su "carga genética" a los tejidos, después de lo cual los genes modificados crearánnuevas instrucciones para esos tejidos y ayudan a tratar la enfermedad. La tecnología vectorial que fue pionera en CHOP condujo al desarrollo de las primeras terapias genéticas aprobadas por la FDA, incluidas Kymriah para la leucemia linfoblástica aguda de células B y Luxturna para la enfermedad retiniana hereditaria.
Para la aplicación segura y efectiva de estos vectores, los investigadores deben tener una imagen completa de dónde el virus entrega su carga genética en el cuerpo. Los métodos convencionales para definir la transferencia de genes dependen de genes informadores fluorescentes que brillan bajo un microscopio, destacando las células que tomanarriba y expresar el material genético entregado. Sin embargo, estos métodos revelan solo células con niveles estables y altos de carga. La nueva tecnología descrita en este estudio permite a los investigadores detectar mejor dónde se expresa la carga, incluso si se expresa a niveles extremadamente bajosniveles, o solo por un tiempo muy corto.
"Los métodos de detección convencionales pierden niveles transitorios o muy bajos de expresión de vectores virales AAV", dijo la líder del estudio Beverly L. Davidson, PhD, Directora de Estrategia Científica en CHOP y Directora del Centro Raymond G. Perelman para Terapias Celulares y Moleculares"Lo que muestra este estudio es que los vectores de AAV conducen a la transferencia de genes en muchos más lugares de lo que nosotros y otros grupos pensamos inicialmente".
Obtener una imagen completa del alcance de esta carga genética es particularmente relevante después del descubrimiento del sistema CRISPR / Cas9, que ha revolucionado la edición del genoma eliminar, agregar o alterar secciones de ADN y abre la puerta a un nuevogrado de medicina de precisión. La maquinaria de edición de genes CRISPR / Cas9, cuando se expresa en células incluso por un corto tiempo o en niveles bajos, permite la edición de ADN dirigida.
Muchos grupos buscan utilizar vectores AAV para administrar CRISPR / Cas9 debido a su historial como un vehículo seguro para la transferencia de genes. Debido a limitaciones metodológicas, se han perdido muchos sitios de transferencia de genes de bajo nivel. Combinando AAV con edición de genesla maquinaria requiere un método más sensible para aplicaciones seguras y efectivas.
Para abordar esta brecha crucial en el conocimiento, Davidson y su laboratorio desarrollaron un nuevo método de detección de AAV que utiliza ratones transgénicos editores-reporteros sensibles que están marcados incluso con un breve estallido de expresión o muy baja expresión. En comparaciones lado a ladoCon los métodos de detección convencionales, el nuevo método redefine radicalmente el verdadero alcance de la transferencia génica mediada por AAV.
Según los autores, este novedoso método de detección ayudará a mejorar la seguridad de los enfoques de edición de genes AAV porque define mejor los sitios donde el vector expresa el gen modificado. Es importante, porque no se requieren niveles de expresión altos y estables para una edición efectiva,los niveles de dosis que no serían ideales para una expresión más estable podrían funcionar muy bien para la edición del genoma. Además, este método amplía la utilidad de la plataforma AAV al revelar nuevos sitios de transferencia génica nunca antes descritos. También ofrece la oportunidad deComprender mejor la biología básica de los vectores AAV y lo que se requiere para que ellos entreguen efectivamente su carga genética.
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Materiales proporcionado por Hospital de Niños de Filadelfia . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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