Resultados de estudios preclínicos realizados por investigadores de MUSC informados en la edición de julio de 2016 de PLOS One , demuestre por primera vez que el factor de transcripción KLF12 promueve el crecimiento de células CRC, en parte, activando EGR1. Además, los datos demuestran que los niveles de KLF12 y EGR1 se correlacionan sinérgicamente con malos pronósticos de CRC.
El CCR es el tercer cáncer más común y el tercero más letal en los EE. UU. Como la mayoría de los cánceres, el desarrollo del CCR se ve estimulado por una serie de mutaciones genéticas y cambios epigenéticos que alteran la expresión génica. A su vez, esta expresión genética alterada inicia tumores y respalda suPor lo tanto, los factores de transcripción que regulan la expresión génica y las vías de señalización durante la carcinogénesis se han estudiado durante mucho tiempo como posibles dianas terapéuticas.
El Dr. Raymond DuBois, Decano de la Facultad de Medicina MUSC, Profesor de Bioquímica y Biología Molecular y autor principal del artículo se centra en comprender el papel de la inflamación en el cáncer. "Hemos estado estudiando las conexiones entre la inflamación ycáncer en mi laboratorio desde hace algún tiempo y hemos determinado que algunos mediadores inflamatorios estimulan la progresión del cáncer ", dijo DuBois." Descubrimos que KLF12 aumentó drásticamente en presencia de inflamación en ciertos cánceres, por lo que estábamos tratando de determinar elmecanismos moleculares responsables de estos efectos ".
Otros investigadores que estaban estudiando el desarrollo renal identificaron previamente el factor de transcripción KLF12 como un represor transcripcional del gen AP-2α. Luego se descubrió que la expresión de AP-2α también se reduce en el tejido tumoral avanzado del CCR en comparación con el tejido normal compatible y esa pérdidade AP-2α promovió la invasión del CRC. Esta conexión iluminó un vínculo potencial entre KLF12 y CRC. Los estudios in vitro muestran que KLF12 promueve la proliferación e invasión de células de cáncer gástrico GC, y que los niveles de KLF12 están elevados en aproximadamente el 40% de los GC pobremente diferenciadosy se correlacionan con el tamaño del tumor. Además, análisis recientes de todo el genoma encuentran niveles altos de KLF12 en aproximadamente el 40% de los adenocarcinomas de esófago y en el 45% de los tumores salivales. Sin embargo, hasta ahora, el papel de KLF12 en el CCR no estaba claro.
El equipo de investigación de MUSC diseñó una serie de experimentos in vitro e in vivo para aclarar la función de KLF12 en el CCR. El primer conjunto de estudios examinó la expresión de KLF12 en 7 líneas celulares de CCR humano. No solo encontraron que KLF12 se expresaba en 6de las 7 líneas celulares, pero también que su sobreexpresión condujo a un aumento en el número de células y la caída de KLF12 condujo a una reducción del número de células. Además, también encontraron que la sobreexpresión de KLF12 condujo a la formación de tumores cecales más grandes mientras que la caída de KLF12condujo a la formación de tumores cecales más pequeños, en comparación con los controles. Por lo tanto, este conjunto de experimentos indica que KLF12 promueve el crecimiento del CCR al mejorar la proliferación y / o supervivencia de las células cancerosas.
El siguiente conjunto de experimentos se centró en aclarar qué genes diana de KLF12 pueden estar involucrados en la regulación del crecimiento del CRC. Utilizando ensayos de microarrays, los investigadores encontraron que la sobreexpresión de KLF12 alteraba múltiples genes, incluido EGR1. Se informó anteriormente que KLF12 regula la expresión dealgunos genes diana se unen al motivo CACCC. Encontraron que el promotor EGR1 contiene dos posibles motivos de unión al ADN de KLF12 ubicados en -1488 pb motivo 1 y -808 pb motivo 2 en relación con el sitio de inicio de la transcripción. Utilizando el ensayo ChIP,El equipo de investigadores de MUSC descubrió que KLF12, de hecho, se une fuertemente al motivo 2 del promotor EGR1 pero no al motivo 1. Los experimentos in vitro demostraron que, tanto en los niveles de ARNm como de proteínas, las células CRC con niveles indetectables de KLF12 expresaron los niveles más bajos.de EGR1 en comparación con células que expresan altos niveles de KLF12. Los estudios in vivo que utilizaron ratones implantados con células tumorales CRC que sobreexpresaron KLF12 mostraron que la expresión de EGR1 estaba regulada al alza comparojo a ratones implantados con células de control.Además, la tinción de muestras de tejido de CRC humano produjo el mismo patrón.En conjunto, estos resultados indican que KLF12 activa directamente EGR1 en CRC.
El tercer conjunto de experimentos analizó si EGR1 mediaba los efectos de KLF12 en el crecimiento de células tumorales. Los resultados mostraron que la eliminación de EGR1 redujo el crecimiento de células tumorales inducido por KLF12, mientras que la sobreexpresión de EGR1 promovió el crecimiento de células CRC in vitro, así como el crecimiento tumoralen el modelo de ratón. Los resultados de este conjunto de estudios, por lo tanto, indican que KLF12 mejora el crecimiento de células CRC activando EGR1.
El conjunto final de experimentos evaluó si los niveles de KLF12 y EGR1 se correlacionan con el pronóstico de los pacientes con CCR. Utilizando datos de expresión génica de bases de datos de microarrays disponibles públicamente Moffitt [n = 177]; Vanderbilt Medical Center [n = 55], los pacientes con CCR fueronestratificados por el nivel de expresión de KLF12 y / o EGR1. Estos datos mostraron que los pacientes con niveles altos de KLF12 o EGR1 tuvieron peores resultados en comparación con aquellos con niveles bajos de estos genes, y que aquellos con niveles altos de KLF12 y EGR1 tenían latasas de supervivencia más bajas.
Este es el primer estudio que aclara el papel de KLF12 en el crecimiento y la progresión del tumor de CCR que parece ocurrir, al menos en parte, a través de la activación de EGR1. El hallazgo de que las contribuciones sinérgicas de KLF12 y EGR1 producen los peores resultados entre los pacientes de CCR iluminasu potencial en el desarrollo de nuevas terapias. Se necesitan más estudios para aclarar aún más el papel de KLF12 en la progresión del CCR y su potencial como un nuevo marcador pronóstico y objetivo terapéutico.
Fuente de la historia :
Materiales proporcionados por Universidad Médica de Carolina del Sur . Nota: el contenido se puede editar por estilo y longitud.
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