La combinación del análisis de imágenes con una técnica de microscopía tridimensional permite a los investigadores cuantificar fenómenos de biología celular nuevos o poco entendidos, según un nuevo estudio publicado el 19 de diciembre en la revista de acceso abierto PLOS Biología por Mathieu Frechin, de la compañía suiza Nanolive y sus colegas. Es probable que la técnica ayude a explicar aspectos poco entendidos del comportamiento de los orgánulos celulares: los compartimentos funcionales dentro de una célula.
Se dispone de una amplia variedad de técnicas para estudiar las células vivas, pero muchas de ellas tienen limitaciones intrínsecas, como la necesidad de niveles dañinos de luz o el uso de tintes que interfieren o un contraste y resolución deficientes.
Una forma relativamente nueva de microscopía, llamada microscopía holo-tomográfica, supera algunas de estas limitaciones, al dividir un haz de luz, desviar una parte y dejar que la otra pase a través de la muestra. Cuando las dos partes se recombinan, las diferencias en su ondalos formularios se pueden usar para crear una imagen basada en las diferencias en el índice de refracción de los componentes de la celda. Al inclinar la muestra, se pueden combinar múltiples imágenes para crear una imagen tridimensional de la celda. Todo el proceso se realiza sin colorantes nia niveles muy bajos de luz, preservando la integridad estructural y conductual de la célula durante la captura de imágenes.
En el estudio actual, los autores aplicaron múltiples técnicas de procesamiento de imágenes para extraer datos cuantitativos de sus imágenes holo-tomográficas. Aplicando sus técnicas, cuantificaron por primera vez el flujo de gotas de grasa dentro de una célula completa, midiendo su tasa deformación y cambios en la masa a lo largo del tiempo, y revelando nuevos aspectos de su dinámica, incluida la sincronización de la hinchazón entre un subconjunto de gotas.
La capacidad de la técnica microscópica para capturar datos de toda la célula simultáneamente permitió a los autores proporcionar información nueva importante sobre el proceso intrigante pero poco comprendido del giro de orgánulos. Aquí, en el período previo a la mitosis la etapa de laciclo celular en el que el núcleo se divide en dos, los investigadores muestran que todo el núcleo gira entre 80 y 700 grados durante un período de minutos a horas.
"La capacidad no solo de observar, sino también de medir la dinámica de las células vivas no perturbadas, mediante la aplicación de técnicas de cuantificación a la microscopía holo-tomográfica, puede conducir al descubrimiento de comportamientos celulares fundamentalmente nuevos y una nueva comprensión de los fenómenos estudiados previamentetambién ", dijo Frechin.
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Materiales proporcionados por PLOS . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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