El número promedio de huevos para ratones genéticamente modificados ratones inactivados obtenidos usando métodos previos de inducción de superovulación es de aproximadamente 20, pero en realidad el número es a menudo mucho menor, aproximadamente 10 o menos. Sin embargo, los investigadores de la Universidad de Kumamoto han desarrollado un métodode ultra-superovulación y han obtenido con éxito la ovulación de 100 huevos de un solo ratón hembra.
El crecimiento normal del embrión en etapa de 2 células y la descendencia de estos huevos se ha confirmado mediante la fertilización in vitro y la transferencia de embriones. Se espera que este logro se convierta en una tecnología muy útil para la producción en masa futura de ratones knockout.
El método inducido por ultra-superovulación fue desarrollado por la Prof. Naomi Nakagata y el Dr. Toru Takeo de la División de Ingeniería Reproductiva en el Centro de Recursos y Desarrollo Animal CARD de la Universidad de Kumamoto, Japón. Los resultados se publicaron en PLOS UNO el 29 de mayo de 2015.
Recientemente se ha descubierto que el número de genes que codifican proteínas humanas, que representan menos del 2% del genoma humano, supera los 20,000. La comunidad científica utiliza ratones knockout para analizar fenotipos basales la aparición de características genéticas para analizarfunción de una cantidad tan grande de genes. Por esta razón, es necesaria una producción eficiente de ratones knockout.
En los métodos convencionales de superovulación inducida, la gonadotropina sérica de yegua preñada PMSG, una hormona foliculoestimulante FSH, se administra a ratones noqueados con la intención de desarrollar una gran cantidad de folículos ováricos. Sin embargo, el número real de óvulos se obtuvo de unoel ratón hembra se limitó a 30 como máximo.
El profesor Nakagata y sus colegas tuvieron la idea de agregar antisuero de inhibina al proceso de superovulación. La hormona inhibina se libera de las gónadas durante el desarrollo y es un regulador de la secreción de FSH. La FSH se secreta de la glándula pituitaria y limita el númerode huevos producidos durante la ovulación. El uso de un antisuero de inhibina promueve la secreción excesiva de FSH neutralizando la inhibina en el cuerpo de ratones hembra inactivados. Además, al administrar PMSG simultáneamente, los ratones desarrollaron una gran cantidad de folículos que condujeron a una ovulación exitosa de 100 o máshuevos de un ratón knockout, aproximadamente 3-4 veces más que los métodos convencionales.
"Con nuestro método recientemente desarrollado, es posible reducir la cantidad de ratones knockout hembra utilizados en la recolección de huevos en 1/3 - 1/4 o menos", dijo el Dr. Takeo, quien estuvo involucrado en el desarrollo deprocedimiento ". Reducir el número de animales de experimentación es uno de los pilares más importantes en el bienestar de los animales de laboratorio. No solo desde el punto de vista de la investigación en ciencias de la vida, sino también desde la preocupación social por el bienestar de los animales de laboratorio. Este resultado es muy significativo, y esperamos que este logro contribuya a la promoción de varios estudios de reconocimiento internacional ".
Al permitir una gran cantidad de ovulación de un pequeño número de ratones hembras, facilita la realización de transferencias de FIV y embriones. Por lo tanto, es posible mejorar la eficiencia de la recolección, preservación y suministro de ratones knockout.
El profesor Nakagata anticipa que su método de inducción de ultra superovulación tiene un potencial muy alto para aplicarse a ratas, hámsters y conejillos de indias, pero esto aún no se ha establecido. Espera extender el alcance del método a estos otrosanimales de laboratorio pronto.
El agente inductor de la ovulación está programado para ser lanzado por la compañía farmacéutica colaboradora en el futuro.
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Materiales proporcionados por Universidad de Kumamoto . Nota: El contenido puede ser editado por estilo y longitud.
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